C18 色譜柱是液相色譜中常用的一種固定相，下面是使用 C18 色譜柱的一些基本步驟：
1. 色譜柱的準(zhǔn)備：在使用前，需要對色譜柱進(jìn)行清洗和平衡。通常，可以使用色譜柱廠商推薦的溶劑或流動相進(jìn)行清洗，并在清洗后使用流動相平衡色譜柱。平衡時間通常為 1-2 小時，直到基線穩(wěn)定為止。
2. 流動相的選擇：C18 色譜柱的分離效果主要取決于流動相的組成和比例。通常，流動相包括有機(jī)溶劑和水，可以根據(jù)樣品的性質(zhì)和分離需求選擇合適的流動相。對于普通的反相色譜，常用的流動相組合包括甲醇-水、乙腈-水等。
3. 樣品的準(zhǔn)備：樣品需要經(jīng)過適當(dāng)?shù)念A(yù)處理，使其能夠在流動相中溶解，并去除可能對色譜柱造成污染的物質(zhì)。對于含有機(jī)溶劑的樣品，需要使用低濃度的有機(jī)溶劑進(jìn)行稀釋，以避免對色譜柱造成損壞。
4. 進(jìn)樣：將樣品注入色譜柱，開始分離過程。進(jìn)樣量需要根據(jù)樣品的濃度和分離需求進(jìn)行調(diào)整，通常為幾微升到幾十微升。
5. 洗脫：樣品進(jìn)入色譜柱后，通過控制流動相的流速和比例，使樣品在色譜柱中進(jìn)行分離。不同的化合物在色譜柱中的保留時間不同，因此可以通過監(jiān)測色譜峰的出現(xiàn)和消失來判斷樣品中不同化合物的存在。
6. 色譜柱的清洗和保養(yǎng)：在使用后，需要對色譜柱進(jìn)行清洗和保養(yǎng)，以延長其壽命和保持其分離性能。通常，可以使用與清洗色譜柱相同的溶劑或流動相進(jìn)行清洗，并在清洗后使用流動相平衡色譜柱。此外，還需要避免長時間停留在高壓狀態(tài)下，避免使用可能對色譜柱造成損壞的物質(zhì)，如強(qiáng)酸、強(qiáng)堿等。
總之，C18 色譜柱是液相色譜中常用的一種固定相，使用前需要進(jìn)行清洗和平衡，使用時需要選擇合適的流動相和樣品，并進(jìn)行適當(dāng)?shù)念A(yù)處理和進(jìn)樣，使用后需要進(jìn)行清洗和保養(yǎng)。在使用過程中，需要注意色譜柱的壓力和流量，
發(fā)布于: 2023-08-28